Transferentia (biologia)

Transferentia
subclasse de: biochemistry method[*]

Le transferentia (in anglese blot) es un technica de biologia molecular e in biochimia que permitte recercar le presentia de un molecula determinate (ADN, ARN, proteina, etc.) in un specimen biologic (extracto cellular, fluido biologic, fraction purificate...). Le transferentia consiste in transferer le moleculas a analysar super un supporto solide (per exemplo, un membrana de nitrocellulosa o de nylon), eventualmen post un etapa de separation como un electrophorese sur gel, pois a utilisar un sonda specific (fragmento de ADN o de ARN, anticorpore, etc.) del scopo recercate. Il existe plure variantes in function del moleculas analysate e del methodos de detection utilisate.

Iste technicas, de quales le prime disveloppamentos remonta al medie del annos 70, resta regularmente utilisate in recerca o in clinica.

Historico

Le prime technica de transferentia de moleculas esseva disveloppate in 1976 per Edwin Southern. Le ADN genomic esseva denaturate e taliate, pois le fragmentos obtenite esseva separate per electrophorese. Post transferentia super un membrana, le detection esseva realisate per sondas de ADN radioactive.

Iste technica esseva postea adaptate pro altere typos de moleculas: le ARN e le proteinas, pois, plus recentemente, pro le lipidos o pro le analyse del interactiones inter-molecular.

Le principal technicas de transferentia e de analyse de interactiones es listate in le tabella sequente.

Technica	Nomine	Moleculas	Invention
Transferentia	Southern blot	ADN	1975, Southern
	Northern blot	ARN	1975, Awine et al.
	Western blot	Proteinas	1979, Towbin e 1981, Burnette
Analyse del interactiones	Southwestern blot	ADN-proteinas	1980, Bowen et al.
	Electrophoretic mobility shift assay	ADN-proteinas	1981, Garner & Revzin e 1981, Fried & Crothers
	Northwestern blot	ARN-proteinas	1984, Adams et al.
	Far-western blot	Proteinas-proteinas	1994, Hummler et al.

Actualmente, altere technicas de analyse comencia a remplacer certe technicas de transferentia. Per exemplo, le PCR (1983) e le microarrays de ADN pro le analyse del ADN e del ARN.

Terminologia

Le transferentia de ADN es appellate in anglese Southern blot, in homage a su inventor. Le altere technicas es appellate northern blot pro le ARN, western blot pro le proteinas e far-eastern blot pro le lipidos (in referentia, de modo humoristic, al 4 punctos cardinal: north, south, east e west in anglese). Solmente le parola Southern proveni de un nomine proprie e prende un majuscula.

In francese, il es recommendate ·  · utilisar, per exemplo pro le proteinas, le terminos transferentia de proteinas o transferentia de western. Le nomine anglese del technicas es multo frequentemente utilisate in le litteratura o in le laboratorios.

Le termino buvardage es a vices incontrate pro traducer blot (in referentia al traduction literal de blot significante macula o siccar, passar un papiro bibule super). Patrono:Referentia desiderate

Principio

Principio del technicas de transferentia de moleculas

Iste technicas se devellepa in general in 3 o 4 etapas (le prime etapa, le separation, essente optional).

• Le separation del moleculas a analysar, in general per un electrophorese.
• Le transferentia propriemente dicite del moleculas ab le gel super un membrana.
• L'hybridation con un o plure (multiplexe) sondas marcate.
• Le detection del sondas.

Vider tamben

• Dot blot, simile al transferentias de ADN, de ARN o de proteinas sed sin le prime etapa de separation

Vide etiam:
Portal: Biochimia